طريقة علمية لقياس كمية NMN في العينات البيولوجية
1. مقدمة
تكميلاتنيكوتيناميد مونوكليوتيد (NMN)لرفع التنظيمالمستوى مننيكوتيناميد أدينين ثنائي نيوكليوتيد (NAD+)وقد تم الكشف عنه ليكون تدخلا واعدا لمكافحة الشيخوخة. ومع ذلك، لا يزال كذلك تحد جاد للدقةقم بقياس الوسيط NAD+، NMN وبشكل خاص. تهدف هذه الدراسة إلى تقديم طريقة جديدة، وهي منهجية LC-MS/MS ثنائية النظائر (dimeLC-MS/MS)، لقياس دقيق لNMN في العينات البيولوجية.2. العوامل المؤثرة على الكشف الدقيق عن NMN
يصعب اكتشاف NMN بدقة بسبب تأثره بالإنزيماتالتحلل، التحويل في معالجة العينات، سلوكياته المعقدة في ظروف الأعمدة والاستخراج المختلفة، بالإضافة إلى تأثير المصفوفة.
تحديدا، يتميز NMN بخصائص القطبية العالية والتطاير المنخفض، وهو أمر سهل الذوبان في الماء لكنه يصعب إذابته في المذيبات العضوية. تحد هذه الخصائص بشكل كبير من تطبيق العديد من طرق التحليل الكمي التقليدية.
Bعينات علميةمثل يحمل الدم أنشطة مهمة من CD38 وCD73 (Ecto-5’-نوكليوتيداز)، وكلاهما يمكن أن يستخدم NMN كركيزة.
سلوك NMN في العمود معقد جدا، ربما بسبب طبيعة شحناته ثنائية الجزأ، بحيث تؤثر الفروق الدقيقة في ظروف الاستخراج والعمود بشكل كبير على الكشف الدقيق والموثوق للنصاب.
3. استراتيجيات التكيف معdimeLC-MS/MS لتقليل تأثير عوامل التأثير
لتجنب تداخل العوامل المذكورة أعلاه، a pالروتوتايبالعمودNMN-2 يتم تطبيقه. هذا العموديحتويs جزيئات السيليكا عالية النقاء القائمة على C18 وهي أكثر قدرة على ارتباط المركبات المحبة للماء من جزيئات الكربون، مما يحسن قدرة الفصل.Pحمض الإيكلوريك (PCA) يستخدم لأنه يمكن استخراج NAD+ بكفاءة وNMN من عينات بيولوجية مثل البلازما ذات الحد الأدنى الخسائر.
لضبط تأثيرات المصفوفة،a كمية ثابتة (1 ميكرومتر) من كل المركب النظيريiأضيفت s إلىبيولوجي عينات قبل استخراج PCA.
4. الميزةs من dimeLC-MS/MS
Dمعايير نيوتروبيد النظائر المختلفة، يمكن ل NMN (M + 14) وNMN (M + 5)، في منهجية LC-MS/MS تتبع مصير NMN بدقة أثناء معالجة العينة، التييزيد بشكل كبير من دقة وموثوقية قياس NMN في العينات البيولوجية. بالإضافة إلى ذلك، يمكن لدايم-إل سي-م.س/م إس تقييم كفاءة الاستخراج والتركيزات المطلقة ل NMN في أنواع مختلفة من العينات البيولوجية.
5. الخاتمة
ثهي LC-MS/MS الجديد-منهجية مدفوعة بمعايير NMN مزدوجة النظائر هل أكيوراتيلي و reliabلي قياس NMN في العينات البيولوجية. يمكن استخدامه في الدراسات المستقبلية حول تناول NMN.6. المرجع
أونو، جونيا وآخرون. "القياس المطلق لنيكوتيناميد مونوكليوتيد في العينات البيولوجية بواسطة الكروماتوغرافيا السائلة المتتالية - مطيافية الكتلة المتتالية (dimeLC-MS/MS)." npj aging المجلد 10,1 2. 2 يناير 2024، doi:10.1038/s41514-023-00133-1لماذا تختاربونتاك?
بونتاكهو قائد العالمNMNالصناعة. لدينا أول تقنية تحفيز إنزيم كامل في الصين، وأصبحنا الشركة الرائدة في منتجات الإنزيم المساعد المستخدمة على نطاق واسع في صناعة الصحة، والطب والجمال., الزراعة الخضراء، الطب الحيوي ومجالات أخرى. ومن الجدير بالذكر أنبونتاك هو NMNمورد المواد الخام لفريق ديفيد سينكلير الشهير في جامعة هارفارد. خدماتنا ومنتجاتنا موثوقة. علاوة على ذلك،بونتاكهلومستقلالإنزيم المساعد مركز أبحاث تكنولوجيا الهندسة على المستوى الإقليمي في الصين والمصانع المملوكة ذاتيا، حيث يمكن ضمان نقاء واستقرار المنتجات.
