Надзвичайні переваги надчутливого ІФА з циклічним циклуванням Thio-NAD у визначенні білка денге NS1

1. Вступ

Лихоманка денге – це гостре інфекційне захворювання, що викликаєтьсяВірус денгечерез укус інфікованого комара виду Aedes (Ae. aegypti або Ae. albopictus),з основними симптомами, такими як висока температура, запаморочення, головний біль, висип іДужеболі (біль в очах, м'язах, суглобах або кістках) тощо. Це захворювання широко поширене в тропічному і субтропічному кліматі. За оцінками, від 100 до 400 мільйонів людей інфікуються щороку, причому понад 80% зазвичай протікають у легкій формі та безсимптомному перебігу. Тим не менш, важка форма лихоманки денге може збільшити ризик смерті, якщо її не лікувати належним чином. Таким чином, рання діагностика цього захворювання має важливе значення для його своєчасного лікування.

Слід зазначити, що неструктурний білок 1 (NS1), висококонсервативний глікопротеїн, головним чином виділяється під час інфекціїДенгевірус, який інтенсивно розглядається як основний фактор патогенезуЛихоманка денге. Отже, NSI зазвичай використовується як біомаркер для раннього виявлення цього захворювання.

У цьому дослідженні був проведений імуноферментний аналіз(ІФА)у поєднанні зтіонікотинамід аденіндинуклеотид (тіо-НАД/С-НАД)Метод циклічного руху (надалі іменується надчутливим ІФА) використовується для виявлення NSI з подальшим порівнянням з NAAT для підтвердження його точності виявлення.

2. Переваги та недоліки традиційних методів виявлення дляЛихоманка денге 

В даний час тОсь чотири основні методи виявленнядля Лихоманка денге.


Виділення та ідентифікація вірусу мають високу специфічність, але займають багато часу, займаючи не менше 5 днів. Швидкий тест на антиген є найшвидшим і економічно вигідним серед інших методів, але чутливість і специфічність відносно невисокі. Серологічний тест на основі IgM і IgG обмежений кількістю днів інфікування, так якОб'єктТест необхідно відкласти до тих пір, поки рівень антитіл не підніметься до виявленого рівня.

У клініці НААТ часто застосовується для визначенняЛихоманка денгепо бруду своєї високої чутливості і специфічності. Однак цей метод дорогий, трудомісткий і схильний до помилкового позитиву, який повинен проводити навчений персонал.Щоб подолати недоліки цих методів, був розроблений новий метод виявленняультрачутливий ІФА це застосовано в даному дослідженні.

3. Робочий процес надчутливого ІФА з циклуванням тіо-НАД

Пара антитілєвикористовується для захоплення білка NS1 в бутерброді ІФА, а також лужної фосфатазиємічені на вторинному антитілі. Крім антитіл, є похідне андростерону, 3α-гідроксістероїддегідрогеназа, тіо-НАД і НАДНєвикористовується для побудови системи циклічного циклу ферментів тіо-НАД. Під час реакції циклічності тіо-НАД тіо-НАДН постійно накопичувався у вигляді трикутного числа і міг бути безпосередньо виміряний при поглинанні 405 нм.

4. Порівняння ультрачутливих ІФА і НААТ при виявленні білка денге NS1

У NAAT 60 зразків є денге-позитивними, а 25 — денге-негативними. Значення циклічного порогу NAAT (CT) цих зразків, позитивних на денге, коливалося від 12,42 до 31,41.У надчутливому ІФА 59 зразків є відповідно позитивними до результатів NAAT, тоді як 25 зразків повністю відповідають результатам NAAT.

У порівнянні з НААТ чутливість і специфічність надчутливого ІФА становить 98,3% і 100% відповідно (табл. 2). З 60 підтверджених NAAT зразків пацієнтів з лихоманкою денге, лише 1 зразок є негативним в ультрачутливому ІФА. Дані NAAT показали, що зразок є випадком інфекції DENV 4 типу зі значенням КТ 21,59. Результати надчутливого ІФА майже повністю узгоджуються з результатами NAAT, зі значенням каппа 0,972 (95% ДІ: 0,917-1.0).

5. Висновок

Ультрачутливий метод ІФА простий у виконанні і не вимагає професійних стажистів для роботи. Виявлення може бути запущено відразу після отримання невеликого зразка. Він особливо підходить для раннього виявлення захворювання денге в країнах з низьким рівнем доходу.

Посилання

Chen, Po-Kai та ін. «Вдосконалений метод виявлення білка денге NS1 за допомогою надчутливого ІФА з циклуванням Thio-NAD». Віруси, т. 15,9, 1894. 8 вересня 2023 р., doi:10.3390/v15091894

Переваги та особливості продуктуBONTAC Тіо-НАД/С-НАД

БОНТАК є оне з небагатьох підприємств уКитайякий може виробляти Thio-NADз«Бонзим»Цільноферментативний метод(екологічно чистий;відсутність шкідливих залишків розчинників) та унікальна семиступенева технологія очищення «Bonpure». BONTAC співпрацює з дослідженнями та розробками, виробництвом та продажем, з власних заводів та низку міжнародних сертифікатів для забезпечення високої якості та стабільного постачання продукції.

Застереження

BONTAC не несе відповідальності за будь-які претензії, що виникають прямо чи опосередковано через вашу довіру до інформації та матеріалів на цьому веб-сайті.