طريقة علمية لقياس NMN في العينات البيولوجية

1. مقدمة

مكملات أحادي النوكليوتيد نيكوتيناميد (NMN) لتنظيم مستوى النيكوتيناميد الأدينين ثنائي النوكليوتيد (NAD +) تم الكشف عنه ليكون تدخلا واعدا لمكافحة الشيخوخة. ومع ذلك ، لا يزال من الصعب تحديد الوسيط NAD + بدقة ، ن.م على وجه الخصوص. هذه الدراسة مدعومة بتقديم طريقة جديدة ، منهجية LC-MS / MS بوساطة النظائر المزدوجة (dimeLC-MS / MS) ، من أجل القياس الكمي الدقيق ل ن.م في العينات البيولوجية.

2. العوامل المؤثرة على الكشف الدقيق عن NMN

يصعب اكتشاف NMN بدقة نظرا لتعرضها للتدهور الأنزيمي ، والتحويل في معالجة العينات ، وسلوكياتها المعقدة في مختلف الأعمدة وظروف الاستخراج ، بالإضافة إلى تأثير المصفوفة.


على وجه التحديد ، يتميز NMN بخصائص القطبية العالية والتقلب المنخفض ، والتي يسهل إذابتها في الماء ولكن يصعب إذابتها في المذيبات العضوية. هذه الخصائص تقيد بشكل كبير تطبيق العديد من طرق التحليل الكمي التقليدية.

Bعينات أيليولوجية مثليحمل الدم أنشطة كبيرة من CD38 و CD73 (ecto-5’-النيوكليوتيداز) ، وكلاهما يمكن أن يستخدم NMN كركيزة.

سلوك NMN في العمود معقد للغاية ، ربما بسبب الطبيعة الثنائية لشحناته ، بحيث تؤثر الاختلافات الطفيفة في ظروف الاستخراج والعمود بشكل كبير على الكشف الموثوق والدقيق ل NMN.

3. استراتيجيات التأقلم dimeLC-MS / MSلتقليل تأثير عوامل التأثير

لتجنب تداخل العوامل المذكورة أعلاه ، يتم تطبيق عمود نموذج أولي NMN-2. يحتوي هذا العمود على جزيئات السيليكا عالية النقاء القائمة على C18 والتي تكون أكثر قدرة على ربط المركبات المحبة للماء من جزيئات الكربون ، مما يحسن القدرة على الفصل.

يستخدم حمض البيركلوريك (PCA) لأنه يمكنه استخراج NAD + و NMN بكفاءة من العينات البيولوجية مثل البلازما بأقل قدر من الخسائر.

لضبط تأثيرات المصفوفة ، تتم إضافة كمية ثابتة (1 ميكرومتر) من كل مركب نظائري إلى العينات البيولوجية قبل استخراج PCA.

4. الميزةsمن dimeLC-MS / MS

يمكن لمعايير NMN النظيرية المزدوجة ، NMN (M + 14) و NMN (M + 5) ، في منهجية LC-MS / MS التي تعتمد على العينات تتبع مصير NMN بدقة أثناء معالجة العينات ، مما يزيد بشكل كبير من دقة وموثوقية قياس NMN في العينات البيولوجية. إلى جانب ذلك ، يمكن ل dimeLC-MS / MS تقييم كفاءة الاستخراج والتركيزات المطلقة ل NMN في أنواع مختلفة من العينات البيولوجية.

5. الخلاصة

الهلLC-MS / MS الجديد-يمكن للمنهجية المدفوعة بمعايير NMN النظيرية المزدوجة قياس NMN بدقة وموثوقية في العينات البيولوجية.يمكن استخدامه للدراسات المستقبلية حول تناول NMN.

6. الرقم المرجعي

Unno، Junya et al. "القياس الكمي المطلق لأحادي النوكليوتيد من النيكوتيناميد في العينات البيولوجية عن طريق قياس الطيف الكتلي الترادفي بوساطة الكروماتوغرافيا السائلة بوساطة النظائر المزدوجة (dimeLC-MS / MS)." npj شيخوخة المجلد 10،1 2. 2 يناير 2024 ، دوي: 10.1038 / s41514-023-00133-1

لماذا تختار بونتاك?

بونتاك هو قائد العالم ن.م صناعة. لدينا أول تقنية تحفيز إنزيم كامل في الصين ، وأصبحنا المؤسسة الرائدة في منتجات الإنزيم المساعد التي تستخدم على نطاق واسع في الصناعة الصحية والطب والجمال والزراعة الخضراء والطب الحيوي وغيرها من المجالات. والجدير بالذكر أن BONTAC هو ن.م مورد المواد الخام لفريق ديفيد سنكلير الشهير في جامعة هارفارد. خدماتنا ومنتجاتنا جديرة بالثقة. علاوة على ذلك بونتاك لديها مركز أبحاث مستقل لتكنولوجيا هندسة الإنزيم المساعد على مستوى المقاطعات في الصين والمصانع المملوكة ذاتيا ، حيث يمكن ضمان نقاء واستقرار المنتجات.

اخلاء المسؤوليه

الهل المقالة هيبناء على المرجع فيمجلة أكاديمية. المعلومات ذات الصلة هي زود لأغراض المشاركة والتعلم فقط، ولا تمثل أي أغراض للاستشارة الطبية. إذا كان هناك أي انتهاك ، من فضلك الاتصالالمؤلف من أجلديلتأيون. الآراء المعبر عنها في هذه المقالة لا تمثل موقف بونتاك.