طريقة علمية لقياس NMN في العينات البيولوجية
17 يناير 2024
1. مقدمة
تم الكشف عن مكملات نيكوتيناميد أحادي النوكليوتيد (NMN) لتنظيم مستوى نيكوتيناميد الأدينين ثنائي النوكليوتيد (NAD +) لتكون تدخلا واعدا لمكافحة الشيخوخة. ومع ذلك ، لا يزال من الصعب تحديد كميات وسيطة NAD+ بدقة ، NMN على وجه الخصوص. هذه الدراسة مدعومة لتقديم طريقة جديدة ، منهجية LC-MS / MS بوساطة النظائر المزدوجة (dimeLC-MS / MS) ، للقياس الكمي الدقيق ل NMN في العينات البيولوجية.2. العوامل التي تؤثر على الكشف الدقيق عن NMN
من الصعب اكتشاف NMN بدقة بسبب تعرضه للتدهور الأنزيمي ، والتحويل في معالجة العينات ، وسلوكياته المعقدة في ظروف الأعمدة والاستخراج المختلفة ، فضلا عن تأثير المصفوفة.
على وجه التحديد ، يتميز NMN بخصائص القطبية العالية والتقلب المنخفض ، والذي يسهل إذابته في الماء ولكن يصعب إذابته في المذيبات العضوية. هذه الخصائص تقيد إلى حد كبير تطبيق العديد من طرق التحليل الكمي التقليدية.
تحمل العينات البيولوجية مثل الدم أنشطة مهمة من CD38 و CD73 (ecto-5'-nucleotidase) ، وكلاهما يمكن أن يستخدم NMN كركيزة.
سلوك NMN في العمود معقد للغاية ربما بسبب الطبيعة الثنائية لشحناته بحيث تؤثر الاختلافات الدقيقة في ظروف الاستخراج والعمود بشكل كبير على الكشف الموثوق والدقيق عن NMN.
3. استراتيجيات المواجهة ل dimeLC-MS / MS للحد من تأثير عوامل التأثير
لتجنب تداخل العوامل المذكورة أعلاه ، يتم تطبيق عمود النموذج الأولي NMN-2. يحتوي هذا العمود على جزيئات السيليكا عالية النقاء القائمة على C18 والتي تكون أكثر قدرة على ربط المركبات المحبة للماء من جزيئات الكربون ، مما يحسن قدرة الفصل.يستخدم حمض البيركلوريك (PCA) لأنه يمكنه استخراج NAD + و NMN بكفاءة من العينات البيولوجية مثل البلازما بأقل قدر من الخسائر.
ولضبط تأثيرات المصفوفة، تضاف كمية ثابتة (1 ميكرومتر) من كل مركب نظيري إلى العينات البيولوجية قبل استخراج PCA.
4. مزايا dimeLC-MS / MS
يمكن لمعايير NMN النظيرية المزدوجة ، NMN (M + 14) و NMN (M + 5) ، في المنهجية التي يحركها LC-MS / MS أن تتتبع بدقة مصير NMN أثناء معالجة العينات ، مما يزيد بشكل كبير من دقة وموثوقية قياس NMN في العينات البيولوجية. إلى جانب ذلك ، يمكن ل dimeLC-MS / MS تقييم كفاءة الاستخراج والتركيزات المطلقة ل NMN في أنواع مختلفة من العينات البيولوجية.
5. خاتمة
ويمكن لهذه المنهجية الجديدة القائمة على LC-MS/MS مع معايير NMN ذات النظائر المزدوجة أن تقيس بدقة وموثوقية NMN في العينات البيولوجية. يمكن استخدامه للدراسات المستقبلية حول تناول NMN.6. المرجع
Unno، Junya et al. "القياس الكمي المطلق لأحادي النوكليوتيد نيكوتيناميد في العينات البيولوجية بواسطة كروماتوغرافيا سائلة مزدوجة بوساطة النظائر - قياس الطيف الكتلي الترادفي (dimeLC-MS / MS)." NPJ الشيخوخة المجلد 10,1 2. 2 يناير 2024 ، دوى: 10.1038 / s41514-023-00133-1لماذا تختار بونتاك؟
BONTAC هي الشركة الرائدة في صناعة NMN العالمية. لدينا أول تقنية تحفيز إنزيم كامل في الصين ، وأصبحنا المؤسسة الرائدة في منتجات الإنزيم المساعد التي تستخدم على نطاق واسع في الصناعة الصحية والطبية والجمال والزراعة الخضراء والطب الحيوي وغيرها من المجالات. والجدير بالذكر أن BONTAC هي مورد المواد الخام NMN لفريق David Sinclair الشهير في جامعة هارفارد. خدماتنا ومنتجاتنا جديرة بالثقة. علاوة على ذلك ، تمتلك BONTAC مركزا مستقلا لأبحاث تكنولوجيا هندسة الإنزيم المساعد على مستوى المقاطعات في الصين ومصانع مملوكة ذاتيا ، حيث يمكن ضمان نقاء واستقرار المنتجات.
